细胞简介

该细胞来源于一名1岁男孩的外周血，此男孩患有急性单核细胞性白血病。该细胞能够有效吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞，其细胞膜和胞浆内不含免疫球蛋白，同时表达C3R和FcR。该细胞可以在佛波酯TPA的诱导下向单核细胞系方向分化，并可作为转染宿主。

细胞信息

细胞名称：Thp-1人单核细胞白血病
生长特性：悬浮生长、低密度易聚团，高密度分散
倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727），26小时（PubMed=25984343），约35-50小时（DSMZ=ACC-16）
换液频次：2~3次/周
传代比例：1:2-1:4（实际情况依据细胞量决定）
传代细胞密度：在8×10⁶/ml进行传代，不应超过1×10⁶/ml

培养基推荐配方

RPMI-1640（尊龙凯时中乔新舟货号：ZQ-200）+10%胎牛血清（尊龙凯时中乔新舟货号：ZQ0500）+1%双抗（尊龙凯时中乔新舟货号：CSP006）+β-Mer（终浓度：0.05mM，尊龙凯时中乔新舟货号：CSP005，例：500ml中添加500μl）。β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂，具有抗氧化作用，可降低氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过高但需维持时，可以适当增加β-巯基乙醇的比例（不应超过标准量的15倍）。

THP-1细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需要3-5天恢复状态，细胞对密度有一定依赖性。如果复苏过程中离心去除了冻存液，建议在复苏后48小时内不要进行操作。细胞在低密度时会聚团生长，这属于快速增殖阶段的正常现象。

THP-1细胞的传代

A：THP-1细胞为悬浮细胞，表现出低密度依赖性。细胞密度达到8×10⁵个活细胞/mL时应进行传代，且细胞密度不应超过1×10⁶活细胞/mL。
B：传代比例一般为1:2-4，无需离心，可直接分瓶后补充培养液至T25培养瓶新鲜的完全培养基至7ml。
C：如果对悬浮细胞的密度控制不佳，最佳的方法是进行细胞计数。
D：在培养一周后，可进行一次离心，以去除部分死细胞。

THP-1细胞的冻存

A：使用10%DMSO：900μl FBS + 100μl DMSO（操作时请小心）或直接使用无血清细胞冻存液。
B：收集生长状态较好的细胞于15mL离心管中，调整细胞浓度至约200万-300万/mL以便冻存。
C：根据具体情况放置在-80℃培养箱，最多存放3个月，尽快转移入液氮中进行长期保存。

THP-1培养常见问题

1. THP-1细胞聚团怎么办？少量聚团现象，尤其在细胞密度较低时正常，密度高时细胞会自然分散。如聚团严重，可通过观察细胞状态、调整β-巯基乙醇添加量或更换血清品牌来改善。
2. THP-1细胞出现贴壁怎么办？少量细胞贴壁属于正常现象，可轻轻吹散或丢弃贴壁细胞。但若贴壁细胞比例高于20%，则需检查培养箱的温度、CO2浓度、培养基成分及培养器皿是否正常。
3. THP-1复苏不起来怎么办？该细胞复苏率可能较低，冻存时应适当增加细胞量，活细胞密度应保持在100万-300万/mL。同时，复苏后的细胞需要3-5天才能恢复状态。如出现细胞碎片，建议待细胞密度增大后，通过低速离心去除。

总之，在进行THP-1细胞培养和冻存时，应充分考虑细胞的特性，并有效管理细胞密度和培养条件，以确保细胞的良好生长，您可以在尊龙凯时找到更多相关的培养信息。